動物組織研磨儀針對動物樣品的實驗方法
動物組織研磨儀具有對稱的一對高速大振幅的搖臂,通過研磨珠在樣品管內(nèi)來回不規(guī)則撞擊及摩擦,在幾秒到幾分鐘內(nèi)輕松實現(xiàn)樣品的研磨、粉碎、混合及細(xì)胞破壁。精細(xì)的研磨,細(xì)可以達到5微米。
對于不同的的樣品,動物組織研磨儀需要用不同的條件來處理,這里面主要涉及研磨速度、研磨時間、研磨溫度和研磨珠的選擇。以下是動物組織研磨儀針對動物樣品的實驗方法,僅供參考。
實驗一 昆蟲動物組織研磨
實驗材料: 蠶蛾、蠶蛹組織
1 取蠶蛾一只,剪碎,取其身體組織一塊(直徑不超過8mm)放置于2ml離心管(EP管)中。
2 將管中加入1顆直徑為5mm碳化鎢研磨珠
3 將加完樣品和研磨珠的EP管,在適配器上擺好,開蓋,加液氮冷凍;3~5分鐘后,待樣品在冷凍的情況下脫去水分,及時將EP管的蓋封閉上,繼續(xù)在液氮中遇冷3分鐘。
4 迅速將適配器安置到動物組織研磨儀上。
5 1600rpm條件下,用動物組織研磨儀研磨2分鐘,可得到細(xì)碎的樣品粉末,用于提核酸或蛋白。(研磨時間和轉(zhuǎn)速還可以進一步優(yōu)化)同樣的方法對蠶蛹可行,研磨時間可適當(dāng)增加,效果也非常好!
同類實驗對象:
動物組織研磨儀以昆蟲作為研究材料;需要高通量提取核酸、蛋白進行遺傳或是生理生化分析研究的實驗
實驗二 哺乳動物組織研磨
實驗樣品:小鼠 心臟,脾臟,肝臟組織(動物內(nèi)臟組織核酸提?。?/div>
1、取-80℃冷凍過小鼠組織,直徑不超過5mm放入2ml圓底離心管
2、在離心管中加含有protease inhibitor裂解液;3~5分鐘后,待組織塊在裂解液中解凍。
3、加入5mm不銹鋼研磨珠1-2顆
4、用動物組織研磨儀1500rpm, 研磨2min
實驗結(jié)果3種組織基本被打碎,肝臟組織裂解都比較*,心臟和脾臟在可能會見碎片(如用新鮮組織效果較好),可用重復(fù)研磨解決。
同類實驗對象:
以哺乳動物內(nèi)臟組織為處理樣品;樣品量小,通量高。需要從內(nèi)臟組織中提取核酸物質(zhì)、或進行理化成分分析的實驗。
動物組織研磨儀是名副其實的實驗室樣品制備的多面手,它可以對硬性、軟性、彈性等樣品進行快速的粉碎和均相化處理,符合理化分析實驗室的要求,配置不同體積、不同材料的研磨罐,可以進行干磨、濕磨及冷凍研磨,也可以進行細(xì)胞破碎和DNA/RNA提取,在生物醫(yī)藥、農(nóng)業(yè)、食品、檢測等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。
動物組織研磨儀的結(jié)構(gòu)簡單,仍需正確使用,做好日常維護保養(yǎng),使用中應(yīng)注意如下幾點:研磨機連續(xù)工作時間過長時,拋光輥摩擦生熱溫度高,易燙傷革面,需降溫后再操作。工作前后,應(yīng)清潔拋光輥表面,并打蠟保持輥面光滑無塵。使用中,控制供料輥壓力適當(dāng),以免阻力太大,電器發(fā)熱易燒壞。做好傳動鏈各轉(zhuǎn)動部位的潤滑,保持傳動準(zhǔn)確可靠。